發(fā)布時(shí)間: 2020-03-27 點(diǎn)擊次數(shù): 1275次
PCR儀種類總體可分為兩大類:PCR擴(kuò)增儀和實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀,普通的PCR擴(kuò)增儀又衍生出帶梯度PCR功能的梯度PCR儀、和帶原位擴(kuò)增功能的原位PCR儀等等。PCR技術(shù)現(xiàn)在已成為現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)工作的基礎(chǔ)技術(shù)和有效工具,在醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、檢驗(yàn)檢疫等領(lǐng)域中使用十分廣泛。PCR儀經(jīng)過不斷改進(jìn),已經(jīng)越來越完善和智能化,分類也更加細(xì)化,但廠家一般自行命名型號(hào),技術(shù)指標(biāo)的參數(shù)也不統(tǒng)一,給用戶的選擇帶來了麻煩。
從PCR原理可以看出,PCR儀的關(guān)鍵是升降溫的步驟。經(jīng)過不斷改進(jìn),今天的PCR已經(jīng)越來越完善和智能化。出于市場推廣的戰(zhàn)略需要,各廠家的PCR儀型號(hào)不同,著力宣傳的技術(shù)指標(biāo)和參數(shù)也不盡統(tǒng)一,對(duì)于帶梯度功能的PCR儀,需要考慮梯度模式下不同梯度管排間的溫度均勻性和準(zhǔn)確性,還必須考慮儀器在梯度模式和標(biāo)準(zhǔn)模式下是否具有同樣的溫度特性。這種差異可能導(dǎo)致在梯度模式下得出的z佳條件與標(biāo)準(zhǔn)模式下單獨(dú)做的結(jié)果出現(xiàn)差異。
由于PCR儀需借助樣本和標(biāo)準(zhǔn)品之間的對(duì)比來實(shí)現(xiàn)定量的,對(duì)于PCR系統(tǒng)來說,重要的參數(shù)除了傳統(tǒng)PCR的溫控精確性、升降溫速度等等,更重要的還在于樣品孔之間的均一性,以避免微小的差別被指數(shù)級(jí)放大。
至于熒光檢測系統(tǒng),多色多通道檢測是當(dāng)今的主流趨勢。儀器的激發(fā)通道越多,儀器適用的熒光素種類越多,儀器適用范圍就越寬;多通道指可同時(shí)檢測一個(gè)樣品中的多種熒光,儀器就可以同時(shí)檢測單管內(nèi)多模版或者內(nèi)標(biāo)+樣品,通道越多,儀器適用范圍越寬、性能就更強(qiáng)大。
PCR儀需考慮的另外一個(gè)因素是軟件設(shè)計(jì),這一點(diǎn)目前較新型號(hào)的儀器都有不錯(cuò)的配套軟件可以滿足常規(guī)使用。隨著PCR技術(shù)在臨床診斷、疾病監(jiān)控、藥物監(jiān)測、腫瘤研究等領(lǐng)域的越來越廣泛的應(yīng)用,市面上不同品牌和設(shè)計(jì)的PCR儀也不斷推陳出新。